應用：廣泛應用于寡糖和多糖的結構測定。

原理：該過程包括將多糖的單個組分糖衍生成部分甲基化的糖醇乙酸酯，并通過氣相色譜-質譜聯用分析和定量。

即：多糖樣品中所有游離羥基都被甲基化---甲基化的多糖用三氟乙酸水解---部分甲基化的單糖被NaBH4還原---乙?；?/span>PMAAs---通過正確識別部分甲基化的糖醇乙酸酯，可以確定每個組成糖的連接位置。

重點及難點：

  雖然這些方法已經很好地建立起來了，但是這個過程有許多技術方面的問題，要想成功地進行甲基化分析并正確地解釋所生成的數據，需要對細節的仔細關注和豐富的經驗。博睿糖生物在甲基化方面，已開發出了甲基化試劑盒，專供各種多糖使用。制備了全套甲基化試劑標準品，并開發出了博睿糖寡多糖甲基化糖苷鍵分析軟件，獲得計算機軟件著作權。針對中性糖、酸性糖以及氨基糖，均有一套完整、快速、精準的甲基化操作和分析流程。

項目方案：

中性糖和酸性糖甲基化方案不同，所以甲基化項目開始之前，需要客戶明確樣品是否為中性糖或酸性糖（明確方法可參考單糖組成分析項目）。中性糖甲基化分析：指的是單糖組成分析不含有半乳糖醛酸，葡萄糖醛酸，甘露糖醛酸，古羅糖醛酸的多糖。酸性糖甲基化分析：單糖組成分析中半乳糖醛酸，葡萄糖醛酸，甘露糖醛酸，古羅糖醛酸總和大于10%的多糖?？蛻粜枰崆案嬷侵行蕴沁€是酸性糖。

方案一：

博睿糖甲基化試劑盒?？蛻舾鶕f明書，可自行制備樣品。簡化甲基化實驗試劑的復雜處理。

 方案二：

博睿糖數據庫一次性比對服務?？蛻艨蓪⒁呀洸杉降?/span>GCMS數據，與我公司的標準品數據圖庫進行比對分析，快速確定糖苷鍵種類，準確度完勝國外公共數據庫。

 方案三：

博睿糖甲基化技術服務?？蛻艨蓪悠肺形宜?，進行甲基化實驗及分析，根據客戶提供的單糖數據進行核對。給出糖苷鍵種類及比例。

方案四：

在甲基化之前需要進行糖醛酸還原實驗，工作量比是中性糖甲基化的2倍，由于含有大量的糖醛酸會影響甲基化試劑的親核取代反應。一般采用博睿糖生物的糖醛酸還原儀進行糖醛酸還原2-3周，最后離子色譜糖醛酸含量消失或者小于5%。均可以直接進行甲基化分析。根據客戶提供的單糖數據進行核對。給出糖苷鍵種類及比例。

用量：

中性糖甲基化方案：需要樣品量20-30mg凍干粉。

酸性糖甲基化方案：需要樣品量100-150mg凍干粉。

案例分析：

  多糖甲基化是解析單糖連接位置，也是最經典的多糖高級結構的分析方法。博睿糖生物采用博睿糖甲基化試劑盒，通過甲基化反應，游離羥基被甲基化后水解單糖殘基，將水解單糖的剩余羥基乙?；?。通過氣相質譜，根據博睿糖甲基化數據庫，結合NMR，分析單糖的位置和比例不同，推測此連接和重復結構。